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客户需要提供标本和一抗
实验步骤
1.脱蜡至水
二甲苯Ⅰ(8min)
二甲苯Ⅱ(8min)
无水乙醇和二甲苯1:1(5min)
无水乙醇(3min)
95%乙醇(3min)
85%乙醇(3min)
75%乙醇(3min)
PBS洗3遍
2.抗原修复
抗原修复液柠檬酸钠或EDTA抗原修复液修复。
0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,ph6.0,1000ml)PH值6.0。
抗原修复100℃ 20min ;自然冷却至室温。(如果是脱钙的标本,抗原修复可以10min)
3.PBST洗2遍,PBS洗1遍。每次5min。
4.用30%H2O2和甲醇配制3%的H2O2溶液。室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS洗3遍。
5.封闭 3-5%BSA或者1-2%山羊血清封闭30min
6.除去封闭液液,每张切片加1滴或50μl的第一抗体.
7.洗一抗。PBS洗3遍,每次5min。
8.加聚合物辅助剂1 。37℃孵育20min。
9.孵二抗2h(室温);可以考虑37℃30min。
10.洗二抗 PBS洗3遍,每次5min
11.DAB显色.10Sec—30sec.
12.自来水充分水洗.染苏木素、水洗、酒精分化、脱水、透明、封片。
我们提供:
1. 提供完成实验的玻片
2. 每张切片提供1张合适视野的照片
3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您
服务周期:一周以内
温馨提醒:提供实验必要的信息,例如组织来源、实验目的和拍照要求