品牌:AdvCell
发货:3天内
★ 产品号
Cat No : BCDS0001
★ 产品组成
名称 |
产品号 |
规格 |
储藏条件 |
运输 |
AdvCell® 成软骨分化基本培养基 AdvCell® Chondrogenic Differentiation base Medium |
BCDM0001 |
100 ml |
2-8℃避光 |
冰袋/常温 |
AdvCell® 细胞培养添加物 AdvCell® Cell Culture Supplement |
BCSM0001 |
1 ml |
-20℃避光 |
干冰 |
AdvCell® 成软骨分化添加物 A AdvCell® Chondrogenic Differentiation Supplement A |
BASS0001A |
1 ml |
-20℃避光 |
干冰 |
AdvCell® 成软骨分化添加物 B AdvCell® Chondrogenic Differentiation Supplement B |
BASS0001B |
1 ml |
-20℃避光 |
干冰 |
★ 产品适用范围
适用于人及哺乳类来源的间充质干细胞成脂分化试验,间充质干细胞包括骨髓、脐带以及脂肪来源的干细胞。
★ 培养条件
37℃,5% CO2 无菌恒温培养。
★ 操作步骤
遵守常规细胞培养的一般准则,将 BCDS0001 中BCDM0001、BCSM0001、BASS0001A三组分在使用前37℃解冻之后混合成成软骨分化半完全培养基。
【成软骨诱导】
1.完全培养基的配置:将AdvCell® 成软骨分化添加物 B(BASS0001B) 按1:100与以上成软骨分化半完全
培养混合成完全培养基, 每次混合的量视具体情况而定,完全培养基配置之后在12小时之内使用。
2.按每团成软骨的细胞数为2.5X105个计算所需的细胞量,将所需的间充质干细胞转移到培养管中后,用半
完全培养基淋洗细胞。150g 室温离心5min后收集细胞,并将细胞按7.5x105 个/ml重新悬浮于 半完全
培养基。150g 室温离心5min后收集细胞,并将细胞按5x105个/ml重新悬浮于完全培养基。
3.将0.5 ml(2.5x105个)悬浮的细胞接到15 ml 聚丙烯管中,150g 室温离心5min后并不吸走上清或重悬细
胞。旋松管盖让气体可以进入管中,37度5%CO2静置24小时。
4.每2-3天跟换一次新鲜培养基,跟换时要小心操作以便不破坏管底的细胞团,但是要使细胞团处于自由悬
浮状态。
5.14-28天之后收获软骨团,并将软骨团用福尔马林固定。
6.福尔马林固定后将软骨团用石蜡包埋法包埋。
7.Alcian Blue染色:脱石蜡水化后用Alcian Blue 溶液室温染色30分钟。自来水淋洗2次之后光学显微镜
下观察染色结果。