品牌:AdvCell
发货:3天内
★ 产品号
Cat No :BDSFM0001
★ 产品组成
名称 |
产品号 |
规格 |
储藏条件 |
运输 |
AdvCell® 免疫细胞基本培养基 AdvCell® Immune Cell base Medium |
BICBM0001 |
500 ml |
2-8℃避光 |
冰袋/常温 |
AdvCell® 免疫细胞添加物A AdvCell® Immune Cell Culture Supplement A |
BICS0001A |
20 ml |
-20℃避光 |
干冰 |
AdvCell® 免疫细胞添加物B AdvCell® Immune Cell Culture Supplement B |
BICS0001B |
1 ml |
-20℃避光 |
干冰 |
AdvCell® DC细胞添加物A AdvCell® DC Cell Culture Supplement A |
BDS001A |
1 ml |
-20℃避光 |
干冰 |
AdvCell® DC细胞添加物B AdvCell® DC Cell Culture Supplement B |
BDS001B |
1 ml |
-20℃避光 |
干冰 |
★ 产品适用范围
适用于人及哺乳类来源的DC 细胞培养。
★ 培养条件
37℃,5% CO2 无菌恒温培养。
★ 操作步骤
1.按常规免疫细胞培养的一般准则,如需在生物反应器或培养袋中高密度培养,应优化条件来确定最佳的
操作步骤,将BDSFM0001中三种组分AdvCell® 免疫细胞基本培养基(BICBM0001)、AdvCell® 免疫细
胞添加物A(BICS0001A)、AdvCell® 免疫细胞添加物B(BICS0001B)在使用前37℃解冻之后混合,做
成半完全培养基。
2.准备新鲜的外周血单个核细胞(PBMC)。将外周血单个核细胞铺在培养瓶中,加入适量以上半完全培养
基,在37℃,5% CO2 的恒温培养箱中孵育2-3 小时,弃掉含非贴壁细胞的培养基。用生理盐水洗涤贴
壁细胞(主要是CD14+单核细胞)三次之后,加入新的半完全培养基。并按10-cm培养皿的表面积添加
20 µl AdvCell® DC细胞添加物A (BDS001A)的量,加入AdvCell® DC细胞添加物A (BDS001A),以
此培养基培养贴壁细胞,保持细胞度在1~3×105 细胞/cm2 之间。研究者可视情况加入灭活的人自体
血浆。
3.在37℃,5% CO2 的潮湿培养箱中连续孵育5天,建议培养3天左右更换一次新的添加有AdvCell® DC
细胞添加物A (BDS001A)培养基,换液过程保留贴壁和不贴壁的所有细胞。培养6天之后,细胞表现
出典型的树突状细胞的形态和表面标记(细胞CD1a、CD80、CD86、HLA-DR)。
4.诱导成熟DC细胞:按10-cm培养皿的表面积向培养皿中添加20 µl AdvCell® DC细胞添加物B
(BDS001B),以诱导树突状(DC)细胞的成熟。