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CD4+和CD8+含量高低代表了什么？通过流式细胞术如何检测细胞含量？
CD4和CD8细胞
白细胞又称为免疫细胞( immune ell),包含淋巴细胞和吞噬细胞等,其中淋巴细胞是免疫系统的基本成分。
淋巴细胞包含T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞( CD3-CD19+)、NK细胞( CD3-CD16+CD56+), 其中T淋巴细胞是淋巴细胞的主要组成部分。
T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞,“thymus dependent lymphocyte”简称T细胞
CD3+淋巴细胞指的是全T淋巴细胞,包含CD3+CD4+ 细胞(辅助/诱导T淋巴细胞)、CD3+CD8+细胞(抑制/细胞毒T淋巴细胞)。CD4+CD45RA+/CD4+CD45RA+62L+ (CD4+T细胞纯真亚群)和CD4+CD45RA-/CD4+CD45RO+(记忆亚群)、CD28+(功能亚群)、CD38+、HLA-DR+( 激活亚群)、CD95+(凋亡亚群)等。
接下来讲一下最基础的通过流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+和CD8+含量。
实验步骤:
1.取100μL全血加入30μL肝素钠溶液处理成抗凝血;
2.取抗凝血100ul加入FITC anti-mouse CD3 Antibody(2μL)、APC anti-mouse CD4 Antibody(1μL)、PerCP/Cyanine5.5 anti-mouse CD8b.2 Antibody(1μL);
3.避光孵育30min;
4.加入红细胞裂解液2mL,轻轻吹打混匀,室温避光反应10min,以1500rpm离心5min, 弃上清;
5.加2mL PBS混匀后,1500rpm离心5min,弃上清;
6.细胞沉淀加入500ul PBS重悬后上流式仪检测。
结果展示:
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