品牌:上海惠诚生物科技有限公司
发货:3天内
总黄酮含量测试试剂盒(C002-96T 酶标板法)
一.测定原理
黄酮中处于相邻位的羰基、羟基可以共同络合金属而显色。在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯和物，加入碱溶液后显红橙色，在510nm处有最大吸收峰。芦丁是公认的黄酮类化合物，常被用作标准品。
二.试剂组成
试剂一：无色液体2.5mL ×1瓶
试剂二：无色液体2.5mL ×1瓶
试剂三：显色液10mL ×1瓶
试剂四：1.0mg/mL芦丁标准溶液200μL×1瓶
三.储存条件及有效期
试剂一、试剂二、试剂三4℃保存，试剂四-20℃保存，可保存3个月。
四.试剂的配制
试剂四应用液：
移取50μL试剂四，加入450 μL双蒸水，充分混匀，得到500 μL 浓度为100 μg/mL的芦丁标准液，分别采用移取0，20，40，60，80，100 μL于酶标板中，加入100，80，60，40，20，0μL双蒸水，得到0，20，40，60，80，100 μg/mL芦丁标准液（试剂四应用液）。
五.操作步骤
|
|
标准孔1 |
测定孔 |
空白孔2 |
|
试剂一（μL） |
25 |
25 |
|
|
样品溶液（μL） |
|
100 |
100 |
|
试剂四应用液（μL） |
100 |
|
|
充分混匀，室温静置6min。
|
试剂二（μL） |
25 |
25 |
|
|
双蒸水（μL） |
|
|
50 |
充分混匀，室温静置6min。
|
试剂三（μL）3 |
100 |
100 |
100 |
充分混匀，室温静置15min，酶标仪510nm处测吸光值。
