TaqMan探针法基因分型

TaqMan探针法基因分型

TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针，进行实时荧光PCR扩增检测的方法，通常用于少量SNP位点的分析，核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。

探针的5’-端和3’-端分别标记一个荧光报告基团(Reporter，如FAM、VIC、HEX等)和一个荧光淬灭基团(Quencher，如TAMRA、BHQ1等)。当荧光探针保持完整时，5′-端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭，仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号。

PCR扩增时，加入一对特异引物的同时，加入一对特异性的荧光探针，该探针只与模板特异性地结合，其结合位点在两条引物之间。当溶液中存在DNA目的片段时，荧光探针与模板退火结合，随着PCR的进行，热启动Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针，其5′-3′外切酶活性(此活性是双链特异性的，游离的单链探针不受影响)就会切割探针，释放5′-端报告基团游离于反应体系中，远离3′-端荧光淬灭基团的屏蔽，破坏两荧光分子基团间的能量转移（FRET），因此5′-端报告基团受激发所发射的荧光信号就可以被探头检测到。每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号累积与PCR产物形成的同步，荧光信号的强度能够代表模板DNA的拷贝数。

服务内容

1、基因和SNP序列信息分析。

2、实验方案讨论与确定。

3、引物和探针的设计优化。

4、引物和探针的合成。

5、qPCR实验。

6、数据分析整理。

7、报告生成。