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天门冬酰胺酶Asparaginase
来源：黑曲霉//米曲霉 Aspergillus niger//Aspergillus oryzae
供体：黑曲霉//米曲霉 Aspergillus niger//Aspergillus oryzae
别名：门冬酰胺酶
MF： C14H17NO4S
CAS： 9015-68-3
类别：其他抗肿瘤药及辅助治疗药
用途：(天）门冬酰胺酶为抗肿瘤酶制剂。对急性粒细胞型白血病和急性单核细胞白血病有一定疗效。对恶性淋巴瘤疗效也较好，对急性淋巴细饱白血病缓解率在50%以上，对于常用药物治疗后复发的病例也有效，但是单独使用不仅缓解期短，且易产生耐药性。对机体免疫尚有抑制作用。但是肠杆菌（天）门冬酰胺酶含内毒素，可引起发热、食欲减退、恶心、呕吐、腹泻，有的病人头痛、头昏、嗜睡、精神错乱等，有的病人有血浆蛋白低下，血脂质过高或过低，氮质血症和肝功能损伤，有的病人有骨髓抑制，血小板和白细胞下降。有的病人脱发、蛋白尿、胰腺炎。用前必须先做皮试，以免引起过敏反应，有过敏史病人应十分小心或不用。不同药厂、不同批号的产品其纯度和过敏反应均有差异，使用时要慎重。有致畸胎作用、妊娠早期禁用。肝肾功能严重损害者忌用。
可用于静注、静滴、肌注和鞘内注射。一般剂量：20～5000U/kg,或10000～15000U/m%<2，每周3～7次。从每日500～1000U/kg，较佳。亦可每周应用一次，每次25000U/kg.一般以3～4周为一疗程.总剂量应根据所用药物的纯度和毒性而定,静注以生理盐水20～40ml稀释,静滴以5%葡萄糖液或0.9%氯化钠注射液500ml稀释.
生产方法：菌种培养采取大肠杆菌Escherichia Coli A.S.1.357，牛肉汁培养基100ml，蛋白胨1g，氯化钠0.5g和琼脂2～2.5g,在370C下，试管培养24h，茄瓶培养8h ,锥瓶培养16h。
大肠杆菌肉汤培养基；370C;2d→菌种培养肉汤菌种
种子培养培养基用10%的玉米浆接种量1%～1.5%，在370C下，通气搅拌培养6～8h。
肉汤菌种玉米浆；370C;6h→种子培养种子菌种
发酵罐培养取10%玉米浆接种量8%，在370C下，通气搅拌培养6～8h，离心，分离发酵液，得菌体，搅拌下加入2倍发酵液量的丙酮，压滤，滤饼过筛，自然风干成菌体干粉。
种子菌种玉米浆; 370C；7h→发酵罐培养发酵液丙酮→压滤，风干干菌体
提取、沉淀每千克菌体干粉加入pH8的硼酸缓冲液（0.01mol/L）10L，在搅拌下370C保温1.5h后，降温到300C左或，用乙酸溶液（5mol/L） 调节pH4.2～4.4,压滤，加入2倍于滤液体积的丙酮，静置3～4h，待沉淀完全，过滤，收集沉淀，晾干，即得干粗酶。
干菌体硼酸缓冲液；pH8;370C→提取提取液HAc;pH4.3→沉淀干粗酶
热处理取粗制酶1g 加入20ml 甘氨酸溶液（3g/L即0.3g），调节pH8.8,搅拌1.5h，离心，收集上清液，加热到600C，热处理30min。离心弃去沉淀，上清液加2倍体积的丙酮，析出沉淀，离心，收集酶沉淀，加pH8磷酸缓冲液（0.01mol/L），再离心弃去不溶物，得上清酶沉液。
