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一、免疫共沉淀概述
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础,是研究蛋白质互作的经典方法。基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异的抗体进行孵育,若裂解中有和抗原互作的蛋白,则会形成“抗体-抗原-抗原互作蛋白”的免疫复合物,该免疫复合物经纯化、洗脱、收集,即可用于SDS-PAGE,western blot及质谱分析,进而鉴定出与抗原有互作的蛋白质。
图1:免疫共沉淀原理
二、技术优势
与Pull down、酵母双杂交等研究蛋白互作的方法比,免疫共沉淀鉴定到互作蛋白是细胞内与目的蛋白(抗原)天然互作的,符合体内真实生理情况,可信度更高。
三、技术流程
图2:免疫共沉淀技术服务流程
四、服务内容
1、蛋白质抽提与定量;
2、免疫共沉淀(以normal IgG作为对照);
3、SDS-PAGE分离,western blot和(或)质谱鉴定互作蛋白;
4、结果分析与实验报告整理。
五、顾客提供
1、组织、细胞、蛋白质溶液等样品、用于免疫共沉淀的一抗(如果公司抗体库里没有)及目的蛋白的相关信息;
2、如需构建基因的过表达载体,则还需提供过表达载体及其相关信息,没有载体的本公司可以构建载体;
3、其他与免疫共沉淀相关信息。
六、实验报告内容
1、免疫共沉淀电子图片及分析结果;
2、相互作用蛋白鉴定结果,质谱鉴定结果和(或)western blot鉴定结果;
3、完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
七、实验服务周期及收费标准:咨询免费热线:400-699-1663
八、质量承诺:提供客观,真实的免疫共沉淀实验结果。