生化检测中血糖、血脂、肝肾功能等的检测通常采用酶光度法,检测原理很多是利用Trinder反应,所需的色原底物和酶对实验有要求,稳定性不够理想,可以通过一种聚合物稳定剂来改善。
在Trinder反应中应用的色原底物如TOOS、MAOS、ADPS等,它们属于苯胺磺酸钠盐,配制成水溶液后不能长时间暴露于空气中,会被缓慢氧化,所以通常以粉末试剂保存需临时配制成溶液。另一方面,酶对反应体系的温度、pH值都有较高的要求,甚至在浓度过低使也容易失活。所以提高它们的稳定性是很有价值的。
通过研究发现,一种具有特殊结构的聚合物对色原底物和酶的稳定性有显著提高。该聚合物具有R1R2R3的结构通式,R1选自烯烃不饱和基团或烯烃不饱和单体;R2选自酯基COO或醚基O;R3选自聚乙二醇、聚氧丙烯、聚丙二醇、聚丙烯醇等聚合物基团。
应用这种聚合物,可以通过与酶和色原底物的相互作用增加其稳定性,从而使多种体外检测项目可以在极端环境下(如高温)保持酶和色原底物的稳定,使检测结果偏差较小,准确性更高,可与其他组分组成稳定酶和色原底物的组合物,应用于酶催化显色反应中、制备基于酶催化显色反应原理的体外检测产品中以及制备酶和色原底物的稳定剂中。
适用的酶制剂包括:过氧化物酶如POD或HRP、胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶、甘油激酶、磷酸甘油氧化酶、脂蛋白脂肪酶、尿酸氧化酶、丙酮酸氧化酶、葡萄糖氧化酶、肌酐水解酶、肌酸水解酶中的一种或者两种以上。
聚合物稳定剂适用的Trinder’s色原底物包括:TOOS、TOPS、MAOS、MADB等以及它们的组合物4-AAP、MBTH。上述色原底物和酶是酶光度法常用的试剂,德晟是生产厂家,可以提供多种色原底物和酶制剂。